乳铁蛋白双抗体夹心ELISA检测方法的建立
wf（2022）
摘要
乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)是一种重要的铁离子结合蛋白,因其在抗菌杀菌、抗病毒及调节机体免疫方面效果显著,近年来被广泛应用于食品领域.试验旨在建立LF双抗体夹心法检测方法.试验以乳铁蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,应用常规的细胞融合技术获得18株杂交瘤细胞株,进而获得腹水抗体18个,效价测定结果显示13株单克隆抗体的效价均在1:2.56×105以上;用效价测定较高的13株抗体作为包被抗体,用辣根过氧化物酶标记过的多克隆抗体作为酶标抗体,经过配对筛选,8号单克隆抗体作为包被抗体,命名为FL8,建立牛乳铁蛋白的双抗体夹心ELISA检测方法,最低检测限为0.05 ng/mL,最适检测范围为0.05～3.2 ng/mL.
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